抗体制备
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技术优势
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抗体制备简介

抗体制备技术服务范围


丹港生物提供多肽设计及合成、多克隆抗体制备、单克隆抗体制备、抗体纯化及抗体标记等服务。


多肽→ 多克隆抗体
1. 多肽合成:纯度>85%(一般会做到>90%),10 mg,长度12-22AA
2. 多肽与KLH偶联 (2-3 mg)
3. 抗体生产周期为12-15周,包括2只兔子,4次免疫
4. 亲和层析纯化抗血清
5. 终产品:2-3 mg多肽;1-2 ml免疫前血清;2-5 mg纯化后的抗体;ELISA检测结果(>1:40,000)

基因多克隆抗体
1. 基因扩增、载体构建、大肠杆菌系统蛋白表达
2. 免疫,亲和层析纯化抗血清
3. 抗体生产周期为14-16周
4. 终产品:质粒(带有目的基因);1 mg蛋白;1-2 ml免疫前血清;2-5 mg纯化后的抗体;ELISA检测结果(>1:40,000)

磷酸化多肽→ 多克隆抗体
1.多肽合成
 a.磷酸化多肽: 纯度>95% ,10 mg,长度12-22个氨基酸
 b.非磷酸化多肽:纯度>75% ,10 mg,长度12-22个氨基酸
2.磷酸化多肽与KLH或BSA偶联(2-3 mg)非磷酸化多肽与BSA偶联
3.抗体制备周期13-16周,包括2只兔子,4次免疫
4.亲和层析纯化抗血清,去除非磷酸化抗体、纯化磷酸化特异性抗体
5.终产品:免疫前血清收集;2-3 mg多肽(未修饰肽和磷酸化修饰多肽);2-5 mg磷酸化特异性抗体;ELISA检测结果(效价>1:40,000)

Western检测保证多克隆抗体制备
1.多肽序列设计与多肽合成
2.多肽偶联至载体
3.抗体生产周期15-18周
4.亲和层析纯化抗血清
5.终产品:2-3 mg多肽;1-2 ml免疫前血清;2-5 mg纯化后的抗体;ELISA检测结果>1:40,000;Western检测(1:200)以保证抗体来自其中一条多肽

基因 → 单克隆抗体
1. 基因扩增、载体构建、大肠杆菌系统蛋白表达、免疫、收集免疫血清、ELISA检测
2. 取血清效价最高的小鼠的脾细胞与SP2/0进行细胞融合,杂交瘤细胞经ELISA筛选
3. 单克隆抗体生产周期为22-26周
4. 亚克隆后得到稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,亚型鉴定,小鼠腹水的制备及抗体Protein G纯化
5. 终产品:质粒;1 mg蛋白;50 µl免疫前血清;2株杂交瘤细胞株;2-5 mg单克隆抗体(2株);ELISA检测结果(>1:80,000);亚型鉴定报告


抗原多肽设计 → 单克隆抗体
1. 抗原多肽的设计与合成、免疫、收集抗血清、ELISA检测
2. 脾细胞融合,亚克隆,小鼠腹水的制备及抗体Protein G纯化
3. 单克隆抗体生产周期为20-26周
4. 终产品:2-3 mg多肽;50 µl免疫前血清;2株杂交瘤细胞株;2-5 mg纯化后抗体(2株);ELISA检测结果(效价>1:80,000);亚型鉴定报告


磷酸化多肽 → 单克隆抗体
1. 多肽合成
1. 磷酸化多肽: 纯度>85%,10 mg,12-22个氨基酸
2. 非磷酸化多肽: 纯度>85%,10 mg,12-22个氨基酸
2. 磷酸化多肽与KLH或BSA(2-3 mg)偶联,非磷酸化多肽与BSA偶联;免疫、收集抗血清、ELISA检测、细胞融合和杂交、亚型鉴定、亚克隆及细胞冻存、小鼠腹水的制备及抗体Protein G纯化(2株)
3. 单克隆抗体生产周期为21-26周
4. 终产品: 50 µl免疫前血清;2-3 mg多肽(非修饰多肽和磷酸化多肽);2-5 mg磷酸化抗体(2株);ELISA检测结果(1:80,000);亚型鉴定报告

* 额外服务
· 需时4周: 若需要80-100ml的多或单克隆抗血清,我们可额外提供1次免疫和2次血样收集,
· 亲和层析纯化: 25 ml血清的亲和纯化,包括纯化所需的亲和层析柱。
· ELISA检测: 根据要求,对指定血样或纯化后抗体进行ELISA检测。
· Western检测: 根据要求,对抗血清或纯化后抗体的特异性检测。
· 免疫组织化学: 根据要求,检测纯化后抗体对病理切片中特异性抗原的识别。