如果多肽或者蛋白中含有半胱氨酸(Cys)，那么半胱氨酸侧链的巯基之间可以形成二硫键---一种可逆的共价键结构。二硫键结构可以让线性多肽形成更加稳定的二级结构，可以提高多肽的抗水解性，某些情况下还可以增加其与对应报告分子的亲和性。 丹港生物经过在多肽领域内长期深入的研究，积累了大量的宝贵经验，我们已经成功给客户交付了大量的包括一对和两对以上二硫键成环的多肽，并保持了我们高成功率，高质量的特色。
一对二硫键的形成方法
一对二硫键的形成方法相对简单，通常将多肽从树脂上切割下来之后，将多肽溶于合适的溶剂中，使用氧化剂进行氧化即可；反应条件有多种选择，比如空气氧化，DMSO氧化等温和的氧化过程，也可以采用H2O2，I2，汞盐等激烈的反应条件。
空气氧化法:
空气氧化法形成二硫键是多肽合成中最经典的方法，通常是将巯基处于还原态的多肽溶于水中，在近中性或弱碱性条件下（PH值6.5-10），反应24小时以上。为了降低分子之间二硫键形成的可能，该方法通常需要在低浓度条件下进行。
碘氧化法:
将多肽溶于25%的甲醇水溶液或30%的醋酸水溶液中，逐滴滴加10-15mol/L的碘进行氧化，反应15-40min。当肽链中含有对碘比较敏感的Tyr、Trp、Met和His的残基时，氧化条件要控制的更精确，氧化完后，立即加入维生素C或硫代硫酸钠除去过量的碘。
二对及多对二硫键的形成方法
自然随机成环:序列中的Cys之间随机成环，与一对二硫键成环条件相似。
定点成环:定点成环即序列中的Cys按照设计要求形成二硫键，反应过程相对复杂。在固相合成多肽之前，需要提前设计几对二硫键形成的顺序和方法路线，选择不同的侧链巯基保护基，利用其性质差异，分步氧化形成两对或多对二硫键。通常采用的巯基保护基有trt, Acm, Mmt, tBu, Bzl, Mob, Tmob, Meb、TMTr、Npys等多种基团。
