长肽合成
长肽合成
在现代生物学研究中，经常会用到序列比较长的多肽，对于序列中含有60AA以上的多肽，通常会采用基因表达及SDS-PAGE法来获得，但是这种方法周期长，最终产物分离效果差，这样固相合成长肽合成技术成为一种需要。丹港生物经过长期的摸索与积累，对合成工艺及方法不断优化，解决了长肽合成难，纯化难，成功率低、收率低的问题。
长肽合成问题分析
合成中随着序列的增长缩合反应空间位阻增大，为了反应完全就需要延长反应时间，但随着反应时间的延长副反应就越多， 一些缺残的目标肽就随之产生，这些缺残的肽链也是长肽合成过程中所产生的主要杂质。 因此我们不得不探索更优质的反应条件和方法使氨基酸缩合反应进行的更充分更彻底，同时缩短反应时间。除了使用优质的缩合试剂以外。我们总结了以下经验：
1.精准灵活的把控好反应时间来减少副产物。2.采用微波合成法：微波合成法适合一些含有难以缩合的氨基酸的多肽，该方法效果显著并且大大缩短了反应时间。
3.采用片段合成法：当某些多肽用常规合成方法合成困难并难以纯化时，我们也会采用将多肽中某一段的某几个氨基酸缩合之后作为一个整体缩合到肽链上去。
4.采用酰肼合成法：酰肼法合成多肽的方法是固相合成的N末端Cys多肽和C末端多肽酰肼之间的化学选择性反应形成酰胺键而实现多肽连接的方法。该方法根据肽链中Cys的位置，将整条肽链分成多条序列分别合成，最终经过液相缩合反应得到目标肽， 该方法不仅大大缩短了合成时间，而且显著地提高了终产物纯度，因此广泛适用于含有Cys的长链多肽的合成。
长肽纯化问题分析
长肽的特殊性不可避免的导致最后得到的粗品肽组分复杂，因此，对于长肽的HPLC纯化也是一个挑战；我们通过在一系列长肽纯化过程中吸取丰富经验，我们通过采用先进仪器，多纯化体系混用，反复分离等手段，极大提升了长肽的纯度。
